Nació en Buenos Aires el 20 de diciembre de 1925. Fue actriz de teatro, cine y televisión. Estudió en el Conservatorio de Música y Declamación con el maestro Antonio Cunill Cabanellas, egresando en 1942 con Medalla de Oro. Debutó en teatro con la obra "Carnaval del diablo" (1943), cuando apenas era una adolescente. Por este primer trabajo recibe el Premio de la Crítica como mejor actriz joven. Entre sus trabajos en teatro se destacan: "Fascinación", que obtiene el Premio de la Crítica y de la revista Talía, "Todos los hijos de Dios tienen alas", "El mercader de Venecia", "Quiero casarme de blanco", "La sonrisa de la Gioconda", "Prontuario".

En 1950 viaja a Italia, donde estudia cuatro años en la "Accademia d’ Arte Dramático Silvio D’Amico". Al egresar actúa por toda Italia con gran éxito de crítica y público. De regreso a la Argentina en 1958 forma compañía con Alfredo Alcón y Osvaldo Bonet y representa "El perro del hortelano". Luego hace "Recordando con ira". Continúa con gran éxito y repercusión su actuación en las obras: "Orfeo desciende", "Rashomon", "Amoretta", "Las troyanas" —recibiendo esta última el Premio de la Crítica, Talía y del Fondo Nacional de las Artes—, "Fedra", "El conventillo de la Paloma", "Confesiones de una sirvienta", "El jardín de los cerezos", "Dos mujeres con Federico" (bipersonal), "La casa de Bernarda Alba", "Los rústicos", "Un sombrero de paja de Italia", "Sólo cuando me río", "Duse, la divina".

Formó parte de elencos oficiales como los del Teatro Nacional Cervantes y del Teatro General San Martín, pero también actuó en escenarios independientes. Estrenó "Profesión maternal", de Griselda Gambaro, en el Teatro del Pueblo.

Ha realizado unipersonales con títulos como: "Amor y locura" y "La Gallo y yo". En cine se destacó en las obras: "Éramos seis", "Diez segundos", "La muerte está mintiendo", "Después del silencio", "La mano en la trampa", "La cifra impar", "Los gauchos judíos", "El grito de Selena", "La barca sin pescador", "La rosa azul", "El acompañamiento".

María Rosa Gallo, fue también una mujer comprometida con las luchas obreras y la democracia, encabezando habitualmente las marchas por los derechos humanos que comenzaron a realizarse durante la última dictadura militar (1976-1983). En 2002 participó del ciclo del Teatro x la Identidad, organizado por Abuelas de Plaza de Mayo, donde fue dirigida por Agustín Alezzo.

En televisión se destacan las siguientes actuaciones: "La fierecilla domada", "El vals", "Historias de jóvenes", "Dos en la ciudad" (dos veces premiado con el Premio Martín Fierro), "Romeo y Julieta" (recibe el Premio Martín Fierro por su interpretación), "Mi nombre es Coraje", "La extraña dama", "Manuela", "Perla negra", "Casa Natal", "Entre madres e hijas", "La otra tierra", "Alta comedia".

Recibió, entre otros, los siguientes premios: Premio María Guerrero, Molière, Estrella de Mar, el Premio ACE a la mejor actriz dramática por "Tres mujeres altas" (1995) y el ACE de Oro.

Estuvo casada con el actor Camilo Da Passano y con él tuvo dos hijos, Alejandra Da Passano y Claudio Da Passano,ambos actores también.